細胞治療血清的保存和活性維護指南 

細胞治療血清保存流程與關(guān)鍵要點  

1.溫度分級精準(zhǔn)管理  

長期保存：需儲存于-20℃至-80℃低溫環(huán)境，優(yōu)先選擇-70℃超低溫冰箱以大化活性保留，保存期限可達數(shù)年。血清結(jié)冰體積膨脹約10%，分裝時須預(yù)留10%空間（如50mL管裝45mL），避免凍裂污染。  

短期使用：4℃冷藏不超過1個月，超期易激活補體系統(tǒng)，導(dǎo)致免疫細胞（如T細胞、巨噬細胞）非特異性凋亡。  

2.分裝與解凍規(guī)范操作  

分裝策略：按單次用量分裝為10-50mL小份，標(biāo)注“批次+日期+溫度”，避免反復(fù)凍融（超過3次活性下降25%以上）。  

解凍步驟：采用三步法——從-20℃/-80℃轉(zhuǎn)至4℃溶解1天，再移至室溫或37℃水浴輕搖至溶解，嚴(yán)禁直接高溫解凍以防蛋白質(zhì)凝集沉淀。  

熱滅活慎用：僅在明確需要滅活補體時（如免疫實驗）進行56℃/30分鐘處理，否則易導(dǎo)致沉淀物增多，影響血清質(zhì)量。  

3.無菌操作與污染防控  

環(huán)境與設(shè)備：操作前需對超凈臺、離心機、分裝機進行紫外線/化學(xué)消毒，空氣過濾系統(tǒng)持續(xù)運行。操作人員須穿戴無菌手套、口罩、防護服，避免氣溶膠污染。  

物料管理：血清原料需驗證無菌證明，分裝容器（如無菌離心管）須耐低溫且預(yù)消毒。解凍后若出現(xiàn)絮狀沉淀（如脂蛋白變性），可離心（3000rpm/5分鐘）去除，不影響活性則無需棄用。  

4.質(zhì)量控制與監(jiān)測  

外觀檢查：定期觀察血清顏色、透明度，若出現(xiàn)渾濁、沉淀或異味，需立即停止使用并追溯原因。  

活性驗證：通過細胞培養(yǎng)實驗（如神經(jīng)元貼壁率、增殖曲線）驗證血清支持能力，確保與標(biāo)準(zhǔn)批次無顯著差異。  

記錄追溯：建立電子檔案，記錄保存溫度、解凍時間、操作人員及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)，符合21CFRPart11電子記錄要求。  

5.特殊場景處理  

含藥血清：如中藥藥理實驗中含藥血清，需經(jīng)56℃滅活、0.22μm濾膜除菌后分裝，避免藥物與血清成分相互作用。  

胎牛血清：通常不推薦熱滅活，因其可能破壞生長因子活性，影響細胞增殖效率。